ביוטכנולוגיה

סיכום שיעור 14

נטלי גיל

נטלי גיל

פרטי הסיכום

קורס: ביוטכנולוגיה

מספר השיעור: 14

סיכום השיעור

17.03.2021. מגישה: נטלי גיל

סיכום שיעור 14 לקורס ביוטכנולוגיה:

שאלות לבחינה:

מהי ביוטכנולוגיה: כל התשובות נכונות. (נאמר בשיעור קודם).

הדרך הטובה ביותר לבטא חלבון רקומביננטי כך שיעבור גליקוזילציה היא: לבטא את ה-cDNA של הגן בתאים אאוקריוטים.

עבור מולקולה פלורסנטית מסוימת: הפליטה תהיה באורך גל ארוך יותר מהבליעה.

טווח אורכי הגל הנראה: 400-700nm

ריפוי גני: הסכנה היא שבעקבות טיפול יתפתחו מחלות אחרות. אלו סכנות יכולות להיות: כניסה למקום אונקוגני, או שיכנס לאזור לא נכון, יכול להפריע למידע בדנא.

ריצוף גנטי: דנא מאוד מורכב. מכיל 98% דנא שאינו מקודד לגנים- בקרה. 2% פרומוטור או דנא המקודד לגנים. ככל שאורגניזם פחות מורכב אז גם הדנא שלו פחות מורכב. טכנולוגית fish מדובר על פרוב פלורסנטי. לוקחים דנא, חותכים אותו לשניים ומצוותים אליו בהיברזידציה של דנא מסומנת פלורסנטית אחד לאחד וככה נראה  איך הדנא נראה. הפרובים הללו בין 1-3kb. ניתן לדעת אם עבר היברדיזציה, לא ניתן לדעת כמויות. יש צורך בשיטות מדויקות יותר. ניתן לקבוע מין בעזרת fish, PGD. ממוצע גנים בין 1000-3000 בסיסים. יצירת mrna בתהליך שעתוך חלק מהדנא במקום ספציפי נפתח אחד מגדילי דנא המשמש כתבנית לסינטזת רנא וכך הוא נותר. תהליך השעתוק שונה מהשכפול בכך ששרשרת הרנא ניתקת מדנא בסוף התהליך ונותנת כך אפשרות ליצירת כמה עותקים מאותו גן לפי הצורך והרנא נוצר קצר מדנא- אורכו כמה אלפי נוקלאוטידים.                                                  שיטות לאנליזת דנא והרנא: PCR: שיטה מהירה, מבצעים על כמויות קטנות ברמת תא בודד והמשך בסיכום. Real time PCR כל מחזור בודקים כמות בסמן פלורסנטי. מוגבלים לכמות הקריאות שאפשר לבצע. taqman נקשר ספציפית לאזורים מסוימים ואז רק מתבצאת ראקצית אור. יש יותר תוצרים נראה יותר אור. Digital PCR: מכשיר נוסף, מיקרופלואידיקה. מכניסים מקטע לבועית ואם יש אחד הגנים בטיפה אז נקבל פלורסנציה ונוכל לקרוא. מדובר בגישה רגישה יותר מ-PCR ולא צריך ביקורות. אם רואים זה אומר שיש. microarray מערכת בו משתמשים בזכוכית. שמים התחלה של רצפים של גן מסוים. אם יש גן נוסף גם לו יעשו אותו הדבר. ואז נוסיף דוגמא שלי, נהפוך ל-Cdna ואז הגנים יצמדו לגן מסוים. Deep sequencing: NGS ו- HTS. Ilumina זוהי טכנולוגית קצה. הוסבר על שיטה זו. כשנוסף נוקלואוטיד משתחרר יון- ion torrent. מדובר בהולכה חשמלית. עד עכשיו דובר על ריצןף ברמת התא הבודד ועכשיו ידובר על ריצוף ברמת התא הבודד של רנא. מכשירים שלמדנו: ILUMINA , עבור מיקרופלואידה וטכנולוגיה של פקס לפני.

הרצאה אחרונה תדבר על ריצוף ברמת הרקמה. נרצה לדעת לא רק אילו גנים התבטאו אלא איפה ברקמה הרנא התבטא.

עריכת הסיכום

iw עִבְרִית
X